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质粒提取的问题:我是制感受态细胞转化之后再提取...

先一步步找原因。是实验步聚问题,还是试剂盒的问题, 如果是试剂盒的问题,推荐您用鼎国生物的。 价格应该还实惠点。

实验结果不能肯定的说明结果是成功的,做实验的阴性对照也很重要,阴性对照必须做出阴性结果。如楼下的网友所说,可能是你的感受态菌被质粒污染了。现在我回答一下你的 追问吧:“未转化质粒的感受态细胞在同样的LB上涂板也长出单菌落”,那么这个...

构建完的质粒是想表达还是提质粒保存~表达蛋白的应转化BL21等表达型菌株~提质粒应转化DH5a~然后提质粒-20度冻存~转化的感受态细胞可以保存菌株~但也不能长期保存质粒~

不对,通过转化到感受态细菌中,不是细胞.感受态的大肠杆菌,可以自己制作也可以通过购买.之后将细菌凃到含有抗生素的板子上,长出克隆后挑取单克隆,将单克隆加入含有抗生素的细菌培养基中培养,之后提取质粒,提取质粒可以购买相应的试剂盒,按照试剂...

你好!dh5α感受态细胞是常用的细菌质粒扩增提取细菌,其本身是含有质粒的。普通的大肠杆菌细胞内有一种“免疫”机制,即当外源DNA 侵入时,会产生酶类将外源DNA切除,无法进行复制增殖。而其自身质粒的基因组被修饰(如甲基化)所以不被限制酶识别...

这个问题可以从几外方面着用排查,一个,氨苄是否失效?失一个厂家的或者批次的试一下。 细菌是否产生抗性?我不加质粒,直接用感受态涂板,看是否能长出来。 质粒提取是否出问题了?挑起菌落,去摇菌,而不是用菌落去提质粒。 最后,你是如何知...

没有。

跑出的条带胶回收后酶切?不应该没有条带~酶切不成功也应该有完整的质粒条带~你质粒的条带是否正确~正常应该有三条带~超螺旋最下面最亮~还有开环和线性~

可有数个拷贝的质粒进入同一细胞。但由于质粒不相容性,有些质粒会消失 用的哪种方法,电转化还是化学转化? 这个可能性很多,质粒质量,感受态细胞质量甚至质粒提取的试剂盒质量都有影响

质粒转化一般是没啥问题的。但是结果你杯具了。我总结几个原因: 1.楼上兄弟说热击,标准时间是60-90s,你注意下你是不是热击超时; 2.感受态细胞的问题,感受态是否保存时间过长效率降低;同时,感受态最高的转化效率在解冻的短时间内。你要注...

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